close

Ridzky Ania Advent Yuda, S. Si

Name: Ridzky Ania Advent Yuda, S. Si

Institution:Universitas Airlangga

Title

Studi In Vitro Hubungan Antara Over Ekspresi Gen Pengkode miR-155 dan Gen Penghambat Tumor p53 pada Kultur Fibroblast Embryo Mencit

Received:Rp 41,600,000.00

Proposal Summary

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui hubungan antara over ekspresi gen miR-155 dengan ekspresi gen penghambat tumor p53 pada fibroblast embryo mencit. Penelitian ini akan menjadi landasan untuk memahami hubungan yang mendasari onkogenesis tumor dengan RNA mikro. Gen penghambat tumor p53 adalah faktor transkripsi yang mengatur transkripsi berbagai gen terkait siklus sel, apoptosis, dan penuaan seluler. Down regulasi ekspresi p53 dapat mengawali pembentukan kanker pada sel. Pada penelitian ini dihipotesiskan bahwa ekspresi p53 dipengaruhi oleh RNA mikro 155 pada fibroblast embryo mencit. Vektor lentiviral digunakan untuk membawa dan overekspresi miR-155 pada kultur MEF. miR-155 di kloning pada plasmid vektor pLL3.7 sehingga menghasilkan plasmid rekombinan pLL3.7-miR-155, dan ditransfeksikan bersama dengan plasmid pVSVG, pRSV/REV, pMDLg/pRRE ke dalam sel HEK 293T untuk memproduksi virus yang membawa RNA mikro untuk eksperimen transduksi. Kelompok perlakuan terdiri atas 12 kultur MEF antara lain, kontrol tanpa virus, perlakuan virus pembawa miR-155, dan virus tanpa miR-155, semua perlakuan dilakukan 4 kali pengulangan. Setelah inkubasi, dilakukan kuantifikasi ekspresi gen p53 menggunakan Reverse Transcription-quantitative PCR dengan metode SYBR Green I.